细胞培养中的常见问题及解决方法1
1，悬浮细胞成簇:
可能原因：培养液中含钙 镁离子，支原体污染，蛋白酶过度消化细胞裂解，DNA污染。
解决方法：用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻轻吹吸细胞获得细胞悬浮液，分离培养物，检测支原体。如发现支原体污染，丢弃培养物，用DNaseI处理细胞。
2培养细胞不贴壁
可能原因：胰蛋白酶消化过度，支原体污染，培养基PH过碱，细胞老化，接受细胞起始浓度太低或太高。
解决方法：
缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度；
分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物；
使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2；
启用新的保种细胞；
调节最佳接种细胞浓度。
